Применение метода рентгеновской криотомографии (Cryo-XT)

VV (вирус вакцины) - один из самых сложных вирусов размером более 300 нм с более чем 100 структурными белками. Его сборка включает в себя последовательные взаимодействия и значительные перестройки структурных компонентов. В данном исследовании инфицированные клетки были отобраны с помощью световой флуоресцентной микроскопии и затем визуализированы с помощью рентгеновской микроскопии в криогенных условиях. Томографические наклонные серии рентгеновских изображений были использованы для получения трехмерных реконструкций показывающих различные клеточные органеллы (ядра митохондрии ER) а также два других типа вирусных частиц относящихся к различным стадиям созревания вируса вакцины (IV) незрелые и (MV) зрелые частицы; витафериновые анализы показали связывание актина что препятствует полимеризации и удлинению филаментов вызывая неправильную упаковку или аберрантные вирионы что препятствует прогрессированию вирусной инфекции. Полученные результаты свидетельствуют о том что рентгеновская криотомография является мощным инструментом для сбора трехмерной структурной информации из замороженных и нефиксированных целых клеток.