Análise de fusão multiplex de alta resolução como ferramenta de diagnóstico

O objetivo deste estudo foi desenvolver um RT-PCR multiplex com análise de fusão de alta resolução (HRM) para a deteção rápida e exacta de cinco carbapenemases com o gene 16S rRNA. Foram concebidos seis pares de primers e condições de RT-PCR de acordo com o software Beacon designer. A identificação dos genes foi efectuada através de curvas de fusão e temperaturas com Multiplex RT-PCR utilizando um reagente HRM dedicado. Este é o primeiro ensaio de deteção dos principais genes de carbapenemases num ensaio de dois tubos permitindo a deteção simultânea de 5 dos mais importantes marcadores de resistência às cefalosporinas de 3ª geração e aos carbapenemes.