Clonage des gènes de dégradation de l'huile

Une nouvelle bactérie a été conçue avec un système d'expression efficace pour améliorer sa capacité à dégrader le pétrole dans les environnements contaminés. Des techniques de culture d'enrichissement ont été utilisées avec du pétrole brut comme seule source de carbone pour isoler les micro-organismes. Dix-sept isolats bactériens ont été identifiés à l'aide de tests biochimiques et du séquençage du gène de l'ARNr 16S. Les genres identifiés comprenaient Acinetobacter Pseudomonas Aeromonas Micrococcus Achromobacter Enterobacter Klebsiella Staphylococcus Bacillus Exiguobacterium Brevibacillus et Stenotrophomonas. Une amorce spécifique a été conçue pour amplifier le gène alkB confirmant sa présence chez Pseudomonas aeruginosa. La polymérisation du plasmide a confirmé la présence du gène sur le chromosome. Le gène alkBa été cloné dans un vecteur plasmidique transformé en E. coli et confirmé par PCR. L'expression du gène a été vérifiée et sa contribution à l'efficacité de la biodégradation a été testée en utilisant le n-hexadécane comme substrat. L'efficacité de la biodégradation est passée de 3263 % à 7742 % après 72 heures soit une amélioration de 448 %. Les stratégies d'amplification et de clonage des gènes ont été simulées à l'aide du logiciel SnapGene. Cette étude est la première du genre en Irak.