Clonagem de genes de degradação do óleo

Uma nova bactéria foi projectada com um sistema de expressão eficaz para melhorar a sua capacidade de degradar o petróleo em ambientes contaminados. Foram utilizadas técnicas de cultura de enriquecimento com petróleo bruto como única fonte de carbono para isolar microrganismos. Dezassete isolados bacterianos foram identificados utilizando testes bioquímicos e sequenciação do gene 16S rRNA. Os géneros identificados incluíram Acinetobacter Pseudomonas Aeromonas Micrococcus Achromobacter Enterobacter Klebsiella Staphylococcus Bacillus Exiguobacterium Brevibacillus e Stenotrophomonas. Foi concebido um iniciador específico para amplificar o gene alkB confirmando a sua presença em Pseudomonas aeruginosa. A cura do plasmídeo confirmou a presença do gene no cromossoma. O gene alkBfoi clonado num vetor plasmídico transformado em E. coli e confirmado por PCR. A expressão do gene foi verificada e a sua contribuição para a eficiência da biodegradação foi testada utilizando o n-hexadecano como substrato. A eficiência de biodegradação aumentou de 3263% para 7742% após 72 horas indicando uma melhoria de 448%. As estratégias de amplificação e clonagem de genes foram simuladas utilizando o software SnapGene. Este estudo é o primeiro do seu género no Iraque.