Oczyszczanie i charakterystyka beta-amylazy

β-amylaza została oczyszczona i scharakteryzowana z Bacillus subtilis wyizolowanego ze sfermentowanych nasion Parkia biglobosa. Oczyszczanie przeprowadzono przy użyciu kolumny jonowymiennej DEAE i chromatografii żelowej (Sephadex G-200). Zbadano wpływ temperatury pH i czasu produkcji na produkcję β-amylazy a także właściwości fizykochemiczne oczyszczonego enzymu. Optymalną produkcję β-amylazy uzyskano w temperaturze 37oC pH 70 i czasie 24 godziny. Wyniki wykazały że oczyszczona β-amylaza miała większą aktywność enzymatyczną niż surowe próbki z Bacillus subtilis gdzie aktywność surowego enzymu wynosiła 321 mM/min/ml podczas gdy oczyszczony enzym miał zwiększoną aktywność wynoszącą 2146 mM/min/ml. Stwierdzono że optymalna temperatura i pH oczyszczonej amylazy wynoszą odpowiednio 50°C i 50. Stabilność enzymu w zakresie pH wynosiła od 40 do 90. Przy pH 50 i 70 zachował on odpowiednio 70% i 60% swojej aktywności po 5 godzinach inkubacji. Stabilność temperaturowa wynosiła od 40oC do 70oC ale najbardziej stabilna była w temperaturze 50oC zachowując 64% swojej aktywności po 1 godzinie inkubacji. Enzym wykazywał maksymalną aktywność w stosunku do skrobi rozpuszczalnej i sacharozy.