Otimização da imunofluorescência dupla para tecidos cancerosos

O cancro continua a ser uma questão indeterminada para a medicina moderna. Todos os anos milhões de pessoas desde crianças a adultos morrem porque o tratamento moderno não consegue dar resposta ao desafio. A investigação deve prosseguir no domínio dos novos biomarcadores para os tumores. A biologia molecular tem evoluído nos últimos anos; no entanto este conhecimento não tem sido aplicado na medicina. As descobertas biológicas devem ser utilizadas para melhorar o diagnóstico e as modalidades de tratamento. Neste livro foram utilizadas amostras de cancro colorrectal e da mama humanas fixadas em formalina e incluídas em parafina para otimizar o protocolo de coloração por imunofluorescência dupla. Além disso foi efectuada imunohistoquímica para visualizar os padrões de expressão de cada biomarcador. Relativamente à imunofluorescência dupla foi também testada a viabilidade de anticorpos primários criados em espécies hospedeiras diferentes e na mesma espécie. Por último foram aplicados métodos estabelecidos para a imagiologia simultânea por imunofluorescência multicolor de amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina para a deteção de pares de potenciais biomarcadores do cancro colorrectal (EGFR pmTOR pAKT Vimentina Citoqueratina Pan Ezrina E-caderina) e do cancro da mama (Securina PTTG1IP caspase 3 clivada ki67).