Purificação e caracterização da beta-amilase

A β-amilase foi purificada e caracterizada a partir de Bacillus subtilis isolado de sementes fermentadas de Parkia biglobosa. A purificação foi realizada utilizando coluna de troca iónica DEAE e cromatografia de filtração em gel (Sephadex G-200). Foram investigados os efeitos da temperatura pH e tempo de produção na produção de β-amilase enquanto as características físico-químicas da enzima purificada foram investigadas. A produção ideal de β-amilase foi obtida a uma temperatura pH e tempo de 37 °C 70 e 24 h respetivamente. Os resultados mostraram que a β-amilase purificada tinha mais atividade enzimática do que as amostras brutas de Bacillus subtilis em que a atividade da enzima bruta era de 321 mM/min/ml enquanto a enzima purificada tinha uma atividade melhorada de 2146 mM/min/ml. Os valores ótimos de temperatura e pH da amilase purificada foram 50 °C e pH 50 respetivamente. A estabilidade do pH da enzima variou entre pH 40 e 90. Em pH 50 e 70 ela manteve 70% e 60% da sua atividade respetivamente após 5 h de incubação. A estabilidade da temperatura variou entre 40 °C e 70 °C mas foi mais estável a 50 °C mantendo 64% da sua atividade após 1 hora de incubação. A enzima exibiu atividade máxima em amido solúvel e sacarose.