Purification et caractérisation de la bêta-amylase

La β-amylase a été purifiée et caractérisée à partir de Bacillus subtilis isolé à partir de graines fermentées de Parkia biglobosa. La purification a été réalisée à l'aide d'une colonne d'échange d'ions DEAE et d'une chromatographie par filtration sur gel (Sephadex G-200). Les effets de la température du pH et du temps de production sur la production de β-amylase ont été étudiés tandis que les caractéristiques physicochimiques de l'enzyme purifiée ont été examinées. La production optimale de β-amylase a été obtenue à une température un pH et une durée respectivement de 37 °C 70 et 24 h. Les résultats ont montré que la β-amylase purifiée avait une activité enzymatique supérieure à celle des échantillons bruts provenant de Bacillus subtilis l'activité de l'enzyme brute étant de 321 mM/min/ml tandis que l'enzyme purifiée avait une activité améliorée de 2146 mM/min/ml. La température et le pH optimaux de l'amylase purifiée se sont avérés être respectivement de 50 °C et 50. La stabilité du pH de l'enzyme variait entre 40 et 90. À un pH de 50 et 70 elle conservait respectivement 70 % et 60 % de son activité après 5 heures d'incubation. La stabilité de la température variait entre 40 °C et 70 °C mais était la plus stable à 50 °C conservant 64 % de son activité après 1 heure d'incubation. L'enzyme présentait une activité maximale sur l'amidon soluble et le saccharose.