Purificazione e caratterizzazione della beta-amilasi

La β-amilasi è stata purificata e caratterizzata dal Bacillus subtilis isolato dai semi fermentati di Parkia biglobosa. La purificazione è stata ottenuta utilizzando una colonna DEAE a scambio ionico e cromatografia a gel filtrazione (Sephadex G-200). Sono stati studiati gli effetti della temperatura del pH e del tempo di produzione sulla produzione di β-amilasi mentre sono state studiate le caratteristiche fisico-chimiche dell'enzima purificato. La produzione ottimale di β-amilasi è stata ottenuta a una temperatura un pH e un tempo rispettivamente di 37 °C 70 e 24 ore. I risultati hanno mostrato che la β-amilasi purificata aveva un'attività enzimatica maggiore rispetto ai campioni grezzi provenienti dal Bacillus subtilis in cui l'attività dell'enzima grezzo era di 321 mM/min/ml mentre l'enzima purificato aveva un'attività migliorata di 2146 mM/min/ml. I valori ottimali di temperatura e pH dell'amilasi purificata sono risultati rispettivamente 50 °C e pH 50. La stabilità del pH dell'enzima variava da pH 40 a 90. A pH 50 e 70 dopo 5 ore di incubazione manteneva rispettivamente il 70% e il 60% della sua attività. La stabilità della temperatura variava tra 40 °C e 70 °C ma era più stabile a 50 °C conservando il 64% della sua attività dopo 1 ora di incubazione. L'enzima ha mostrato la massima attività su amido solubile e saccarosio.