Techniques de biologie moléculaire

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) a pour principale application la possibilité d'amplifier un segment d'ADN produisant des millions de copies du segment sélectionné. Le clonage génétique vise à introduire un gène sélectionné dans des bactéries identiques entre elles et cette technique nécessite la présence d'un vecteur de clonage capable d'amplifier un fragment d'ADN cloné dans ces bactéries. Le gène E du virus de la dengue (DENV) est le plus utilisé pour les études moléculaires en raison de l'importance de la protéine E. L'objectif de cette étude est d'établir des techniques d'amplification du gène E du DENV-2 et du DENV-4. La molécule d'ADN a été obtenue auprès de FIOCRUZ à Recife ; les amorces ont été sélectionnées de manière à englober le gène E. L'amplification par PCR a été établie de manière satisfaisante pour le gène E. Une fois déterminées ces techniques sont essentielles dans les étapes d'obtention d'ADN recombinant dans le processus de clonage et d'expression de la protéine E de la dengue.