Trasformazione del cotone con costrutto basato su siRNA mirato a CLCuD

Il cotone è una coltura importante. Negli ultimi anni la malattia del ricciolo fogliare del cotone (CLCuD) è diventata endemica. Ciò ha ostacolato enormemente la produzione di cotone ad alto rendimento. Questa malattia è causata da un gruppo di begomovirus denominato Cotton Leaf Curl Disease (CLCuD). Sono stati tentati diversi approcci di selezione e transgenici per superare il problema. Tra questi l'interferenza dell'RNA (RNAi) si è dimostrata la più promettente. L'uso dell'interferenza dell'RNA è vantaggioso in quanto la tecnica è rispettosa dell'ambiente. Nell'attuale lavoro di ricerca il costrutto genico basato sull'RNAi è stato trasformato in due varietà di cotone d'élite MNH-786 e VH-289 per migliorare la resistenza virale contro la CLCuD. La trasformazione del costrutto nelle piante è stata effettuata con il metodo dell'apice del germoglio mediato da Agrobacterium. La trasformazione e l'integrazione riuscite del costrutto RNAi basato sull'amplicone sono state confermate tramite PCR nella generazione T1 e T2 utilizzando primer specifici per il gene. La capacità di abbattimento del costrutto C2 è stata confermata tramite PCR in tempo reale del titolo CLCuD. Il confronto tra l'indice di malattia virale e il titolo virale ha assicurato che le piante che mostravano un'integrazione positiva del gene RNAi con sintomi minimi avevano anche un titolo virale basso.